Стабильное наследование трансгена и экспрессии гена желтого флуоресцентного белка в потомстве трансгенных растений какао (<i>Theobroma cacao</i>).
Stable Inheritance of Transgene and Yellow Fluorescent Protein Gene Expression in Progeny of Transgenic Cacao (<i>Theobroma cacao</i>) Plants.
Austin G, Jones J, Stevens A, Zhang E, Thompson T, Gomez M, Vrla G, Oh Y, Marelli JP, Jones CM, Staskawicz B, Cho MJ
Аннотация (перевод)
Инструменты генной инженерии обладают потенциалом для быстрого и точного улучшения генома медленно размножающегося какао. Ранее мы разработали эффективный протокол трансформации какао с использованием семядольных эксплантов, полученных из вторичных соматических эмбрионов, с помощью <i>Agrobacterium tumefaciens</i>. В этом исследовании мы демонстрируем, что наш протокол трансформации успешен для элитных сортов INIAPG-038 и Matina 1-6, обеспечивая получение фертильных семян со стабильным наследованием визуального маркера независимо от того, использовались ли трансгенные растения в качестве донора пыльцы или семязачатка. В трансформациях использовались три вектора, каждый из которых содержал гены <i>enhanced yellow fluorescent protein</i> (<i>eyfp</i>) и <i>neomycin phosphotransferase</i> II (<i>npt</i>II). Три трансгенных события INIAPG-038 и одно трансгенное событие Matina 1-6 были использованы для оценки фертильности семян и стабильности наследования трансгена в семенах и растениях какао. Потомство T<sub>1</sub> этих четырех трансгенных событий было проанализировано на экспрессию YFP и наличие трансгена. Экспрессия YFP расщеплялась в соотношении 1:1 во всех событиях при скрещивании трансгенных растений с нетрансгенными, в то время как при скрещивании трансгенных событий друг с другом наблюдалось расщепление 3:1. Трансгенные растения демонстрировали нормальный фенотип по сравнению с нетрансгенными контрольными растениями, образуя семена со всхожестью 97%.
Оригинальная аннотация
Genetic engineering tools have the potential to rapidly and precisely improve the genome of slow-to-breed cacao. We previously developed an efficient protocol for transforming cacao using cotyledonary explants derived from secondary somatic embryos via <i>Agrobacterium tumefaciens</i>. In this study, we demonstrate that our transformation protocol is successful in elite cultivars, INIAPG-038 and Matina 1-6, producing fertile seeds with stable visual marker inheritance regardless of whether the transgenic plants were used as the pollen or ovule donor. Three vectors were used in the transformations, each containing genes for <i>enhanced yellow fluorescent protein</i> (<i>eyfp</i>) and <i>neomycin phosphotransferase</i> II (<i>npt</i>II). Three transgenic INIAPG-038 events and one transgenic Matina 1-6 event were used to evaluate seed fertility and the stability of transgene inheritance in cacao seeds and plants. The T<sub>1</sub> progeny of these four transgenic events were analyzed for YFP expression and transgene presence. YFP expression segregated at a 1:1 ratio in all events when the transgenic plants were crossed with non-transgenic plants, while a 3:1 segregation was observed when transgenic events were crossed with each other. The transgenic plants exhibited a normal phenotype compared to non-transgenic control plants, producing seeds with a 97% germination rate.
Идентификаторы
Canonical: https://research.holos.house/w/b7ca65a4-d4b5-410d-8bda-0b2892a39e8f
DOI: 10.3390/plants15040642