Implementacion del servicio de analisis de Ocratoxina A en cafe

La ocratoxina A es una micotoxina producida por algunas especies de hongos entre los cuales estan especies como Penicilium verrucosum y varios tipos de Aspergillus como A. ocrhaceus, A. westerdijkiae, A. niger, A. carbonarius; se la puede encontrar en diversas fuentes como cereales, vino, cerveza, cafe, cacao. Esta micotoxina ha sido examinada por el Centro Internacional de Investigaciones sobre el cancer (IARC), y la ha clasificado como posible carcinogeno humano (grupo 2B) y por el Comite Mixto FAO/OMS de expertos en Aditivos Alimentarios (JECFA). Este proyecto pretende desarrollar la capacidad del laboratorio para implementar el analisis de residuos de Ocratoxina A en cafe verde, tostado y soluble para atender la necesidad de este tipo de analisis a los productores y exportadores de cafe en el Ecuador. El metodo consiste en lo siguiente: La Ocratoxina A (OTA) es extraida con una solucion de metanol: bicarbonato de sodio 3 por ciento (1:1 v/v). una alicuota del extracto es diluida a 100 m con tampon PBS 1 por ciento y purificada en una columna de inmunoafinidad Ochraprep. El extracto seco es redisuelto en metanol, filtrado y analizado por HPLC, utilizando columna cromatografica de fase reversa (RP-18) con detector de fluorescencia (Ex. 330 nm, Em. 475 nm). El procedimiento consiste en: 1. Preparacion de la muestra. 2. Extraccion de la muestra. 3. Purificacion de la muestra. 4. Cuantificacion por Cromatografia Liquida de Alta Resolucion (HPLC). La cuantificacion se realiza utilizando una curva de calibracion realizada previamente en el equipo. En general se observa que la mejor opcion para este tipo de analisis constituye la utilizacion de columnas de inmunoafinidad, las cuales proporcionan mejor purificacion de extractos y mejor recuperacion de la OTA en diferentes matrices