Криохранение соматических эмбрионов какао (Theobroma cacao L.) методом витрификации
Cryopreservation of cocoa (Theobroma cacao L.) somatic embryos by vitrification
Adu-Gyamfi, Raphael, Wetten, Andrew
Аннотация (перевод)
Потери культивируемого какао (Theobroma cacao L.) из-за болезней и продолжающегося истощения лесов, являющихся местом обитания дикорастущих предков культуры, делают экзsitu сохранение гермоплазмы какао вопроса paramount важности. Для усиления безопасности in situ коллекций гермоплазмы вторичные соматические эмбрионы, происходящие из цветков (размером 2-3 мм), были криохранены методом витрификации. Настоящая работа демонстрирует наиболее простой метод криохранения клонов какао. Оптимальная выживаемость после криоконсервации (74,5%) была достигнута благодаря предварительной культуре продолжительностью 5 сут SSE на среде с 0,5 M сахарозой, за которой следовала дегидратация в холодном PVS2 в течение 60 мин. Для минимизации криоповреждений, связанных со свободными радикалами, источники катионов были удалены из питательной среды развития эмбрионов и/или среды восстановления, причем первое лечение привело к значительному эффекту. После оптимизации на генотипе какао AMAZ 15 тот же протокол оказался эффективным для всех пяти дополнительных протестированных генотипов какао. Для размножения клонов эмбрионы, регенерированные после криохранения, использовались в качестве источников эксплантов, и было установлено, что витрификация сохраняет их эмбриогенный потенциал.
Оригинальная аннотация
Losses of cultivated cocoa (Theobroma cacao L.) due to diseases and continued depletion of forests that harbour the wild progenitors of the crop make ex situ conservation of cocoa germplasm of paramount importance. In order to enhance security of in situ germplasm collections, 2-3 mm floral-derived secondary somatic embryos were cryopreserved by vitrification. This work demonstrates the most uncomplicated clonal cocoa cryopreservation. Optimal post-cryostorage survival (74.5%) was achieved by 5 d preculture of SSEs on 0.5 M sucrose medium followed by 60 min dehydration in cold PVS2. To minimise free radical related cryo-injury, cation sources were removed from the embryo development solution and/or the recovery medium, the former treatment resulting in a significant benefit. After optimisation with cocoa genotype AMAZ 15, the same protocol was effective across all five additional cocoa genotypes tested. For the multiplication of clones, embryos regenerated following cryopreservation were used as explant sources, and vitrification was found to maintain their embryogenic potential
Идентификаторы
Canonical: https://research.holos.house/w/e0fd0df3-8842-48c7-8d7d-124761e6d412